冷冻电镜结构解析则是一种用于确定生物大分子(如蛋白质、蛋白质复合物等)三维结构的技术。以下是一般的冷冻电镜结构解析步骤:样品制备:包括蛋白的表达、纯化以及适当的处理,使其适合进行冷冻电镜观察。例如,对于膜蛋白,需要将其从细胞膜上溶解下来,并进行层析纯化;对于蛋白质复合物,可以通过分别表达和纯化再混合组装,或共表达后进行纯化。某些情况下还需要进行交联、组装等操作以提高样品的刚性和均一性。冷冻制样:将纯化后的样品快速冷冻,使其形成玻璃态的薄冰膜,以保持蛋白的天然结构。...
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